ПЦР – полимеразно-цепная реакция

ПЦР – полимеразно-цепная реакция – метод исследования ДНК при помощи высокотехнологичных методов. ПЦР позволяет установить генетическое сродство между организмами, диагностировать многие болезни (например, ПЦР требуется для диагностики и контроля терапии гепатита С). Анализ на вирус Эпштейна-Барр также осуществляется посредством этого метода.
Метод ПЦР заключается, грубо говоря, в разделении спирали ДНК, выделенной из клетки исследуемого организма и попытке присоединения к ней другой цепочки – с той последовательностью нуклеотидов, которая свойственна предполагаемому организму.

ПЦР осуществляется по довольно непростой схеме, проходящей в несколько этапов:
• I этап ПЦР: выделение нуклеиновых кислот (НК) – «строительного материала» ДНК или РНК.
• II этап ПЦР – амплификация: в смесь из НК, специального фермента полимеразы, праймеров и буферного раствора добавляется короткий участок ДНК, выделенная из клетки исследуемого человека (организма). Затем эту смесь нагревают до высокой температуры (от 90 °С), для того чтобы спираль ДНК раскрутилась. Потом раствор охлаждают до 50-70°С, при которой в действие запускается фермент полимераза. Полимераза «подшивает» нужную цепь ДНК.
• II этап ПЦР – детекция: анализ результатов. Посредством электрофореза в геле выявляется число копий ДНК, которые смогла дошить полимераза. Интерпретация результатов зависит от процентного соотношения таких копий к «неудачным»